La prova d'endotoxina bacteriana (BET) es realitza a la majoria de laboratoris moderns en condicions controlades com el factor important per evitar interferències.
Adequattècnica asèpticaés important a l'hora de preparar i diluir estàndards i manipular mostres.Batapracticar fora de l'equip de protecció personal normal del laboratori (EPI) no és una preocupació tret que el producte a prova requereix consideracions específiques de seguretat dels analistes a causa de la toxicitat o la infecciositat.Guantshauria de ser lliure de TALC, ja que el TALC pot contenir nivells significatius d'endotoxines.Lectors de plaques, banys d'aigua i blocs de calor secS'ha d'utilitzar per a la incubació de mostres en un banc de laboratori allunyat de conductes de calefacció, ventilació i aire condicionat (HVAC), vibracions importants i trànsit de laboratori que puguin afectar els resultats de la prova.Temps i condicions de retenció de mostress'ha de determinar i documentar posteriorment, si cal, per garantir que es puguin generar resultats de proves precisos en el temps qualificat.
Per exemple, si el laboratori rep una mostra d'aigua per a injecció (WFI) o en procés, s'ha de refrigerar o pot romandre a temperatura ambient i durant quant de temps?Abans de la prova, es recomana que els recipients de mostra primaris es barregin adequadament abans d'eliminar les alíquotes de prova per a la prova directa o per a la dilució posterior.
Prova d'endotoxina bacteriana Bioendo, s'inclouen els experimentsmètode de coàgul de gelassaig de prova d'endotoxina iassaig quantitatiu d'endotoxines, l'assaig de prova d'endotoxines del mètode del coàgul de gel és la detecció qualitativa d'endotoxines, aquest experiment requereix que els consumibles siguin un processament de despirogenació, com ara tubs de reacció lliures d'endotoxines, tubs de dilució i puntes lliures de pirogens;La detecció quantitativa d'endotoxines té una prova d'endotoxina cromogènica cinètica, una prova d'endotoxina turbidimètrica cinètica, aquest experiment requereix que els consumibles hagin de complir el nivell superior d'endotoxines inferior a0,005EU/ml(0,001EU/ml), com ara tubs lliures d'endotoxines, puntes lliures de pirogens i microplaques lliures de pirogens, fins i tot un dipòsit lliure de pirogens.Per cert, si es tracta de mostres, el recipient ha de ser l'ampolla de mostra lliure d'endotoxines.
En les proves d'endotoxines, la interferència pot sorgir de diverses fonts, com ara components de la matriu de mostres, reactius de prova o equips.
Per evitar interferències de l'experiment, es poden prendre les mesures següents:
1. Preparació de la mostra: la preparació adequada de la mostra és essencial per a una prova precisa d'endotoxines.
La matriu de la mostra s'ha de provar i optimitzar a fons per garantir la compatibilitat amb l'assaig d'endotoxines.
En particular, les substàncies interferents com els lípids i les proteïnes s'han d'eliminar o minimitzar mitjançant tècniques adequades com la filtració o la centrifugació.
2. Controls positius i negatius: és essencial incloure controls positius i negatius en l'assaig per controlar les interferències.
Els controls positius confirmen la funcionalitat de la prova, mentre que els controls negatius detecten qualsevol contaminació o interferència dels components de l'assaig.
3. Control de qualitat: el control de qualitat s'ha de realitzar en tots els reactius, equips i aigua utilitzats en l'assaig.
Això garanteix que els reactius estiguin lliures de contaminació d'endotoxines i funcionin correctament.
4. Estandardització: l'assaig s'ha d'estandarditzar per garantir que tots els resultats siguin comparables i reproduïbles.
Això implica l'ús d'una corba estàndard per calibrar l'assaig i l'ús de tècniques estandarditzades per a la preparació, incubació i detecció de mostres.
5. Validació: l'assaig s'ha de validar per garantir que és específic, sensible i fiable.
Això implica provar una sèrie de mostres, incloses les que se sap que contenen endotoxina, per determinar l'exactitud i la precisió de l'assaig.
Seguint aquestes mesures, es poden minimitzar les interferències i es poden aconseguir proves d'endotoxines precises.
Hora de publicació: 01-12-2022
