Què és la prova d'endotoxines?

Què és la prova d'endotoxines?

Les endotoxines són molècules hidròfobes que formen part del complex de lipopolisacàrids que forma la major part de la membrana externa dels bacteris Gram negatius.S'alliberen quan els bacteris moren i les seves membranes exteriors es desintegren.Les endotoxines es consideren els principals contribuents a la resposta pirogènica.I els productes parenterals contaminats amb pirògens poden provocar el desenvolupament de febre, inducció de resposta inflamatòria, xoc, fallada d'òrgans i mort en humans.

La prova d'endotoxines és la prova per detectar o quantificar les endotoxines de bacteris Gram negatius.

Els conills s'utilitzen per detectar i quantificar endotoxines en productes farmacèutics en un primer moment.Segons l'USP, la RPT implica controlar l'augment de la temperatura o la febre després de la injecció intravenosa del fàrmac als conills.I 21 CFR 610.13 (b) requereix una prova de pirogen de conill per a productes biològics especificats.

A la dècada de 1960, Fredrick Bang i Jack Levin van trobar que els amebòcits del cranc de ferradura es coagularan en presència d'endotoxines.ElLisat d'amebòcits de Limulus(o lisat d'amebòcits de Tachypleus) es va desenvolupar en conseqüència per substituir la majoria de RPT.A USP, la prova LAL es coneix com a prova d'endotoxina bacteriana (BET).I la BET es podria fer utilitzant 3 tècniques: 1) la tècnica del coàgul de gel;2) la tècnica turbidimètrica;3) la tècnica cromogènica.Els requisits per a la prova LAL conté pH òptim, força iònica, temperatura i temps d'incubació.

En comparació amb RPT, BET és ràpid i eficient.Tanmateix, BET no va poder substituir RPT completament.Com que l'assaig LAL pot estar interferit per factors i és incapaç de detectar pirògens no endotoxines.