Aplicació de la tècnica cromogènica a la prova d'endotoxines bacterianes

La tècnica cromogènica es troba entre les tres tècniques que també inclouen la tècnica del coàgul de gel i la tècnica turbidimètrica per detectar o quantificar endotoxines de bacteris Gram negatius mitjançant l'ús de lisat d'amebòcits extret de la sang blava del cranc de ferradura (Limulus polyphemus o Tachypleus tridentatus).Es podria classificar com un assaig cromogènic de punt final o un assaig cinètic-cromogènic basat en el principi d'assaig particular emprat.

El principi de reacció és que: el lisat d'amebòcits conté una cascada d'enzims de serina proteasa (proenzims) que poden ser activats per endotoxines bacterianes.Les endotoxines activen els proenzims per produir enzims activats (anomenats coagulasa), aquesta última catalitza la divisió del substrat incolor, alliberant un producte pNA de color groc.El pNA alliberat es pot mesurar fotomètricament a 405 nm.I l'absorbància es correlaciona positivament amb la concentració d'endotoxina, llavors la concentració d'endotoxina es podria quantificar en conseqüència.


Hora de publicació: 29-set-2019